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PMSF的配置方法及注意事項


PMSF是絲氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶抑制劑。它抑制蛋白酶,如糜蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、巰基蛋白酶如凝血酶。PMSF抑制絲氨酸蛋白酶的磺化的絲氨酸殘基的活性部位。
 
注意事項(http://www.syxshwz.com):
1.PMSF(苯甲基磺酰氟)溶解到異丙醇中,不能溶解到水中的。-20℃保存也會有結(jié)晶析出,這是正常的,等到溫度稍高混勻就可以了。
2.PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一定要注意防護,手套和口罩。
3.一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應予丟棄。
4.PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。
5.PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時后,可安全地予以丟棄。
 
PMSF的配制方法http://www.syxshwz.com
溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的異丙醇中,定容到10ml,分裝成小份貯存于-20℃,使用時終濃度一般為1mmol/L。
 
使用介紹http://www.syxshwz.com
1)抑制絲氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巰基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 
2)10mg/ml溶于異丙醇(或無水乙醇)中; 
3)在室溫可保存一年,一般保存在-20度或4度.; 
4)工作濃度:17~174ug/ml(0.1~1mM),儲存液濃度為100或200mM; 
5) 在水液體溶液中不穩(wěn)定,30分鐘就會降解一半,必須在每一分離和純化步驟中加入新鮮的PMSF,樣品處理超過1h,補加一次。(見水分解,使用前加入)。
 
 
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