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化學發(fā)光免疫分析技術分析

化學發(fā)光免疫分析是化學發(fā)光與免疫分析相結合的方法,以化學發(fā)光劑、催化發(fā)光酶等物質標記抗原或抗體,當被標記的抗原或抗體與相應抗體、抗原相結合后,發(fā)光底物受發(fā)光劑、催化酶等物質作用,發(fā)生氧化還原反應。反應中釋放出的可見光由配套設備進行采集與處理,獲取測定物濃度,從而達到測定目的。
 
近年來,化學發(fā)光免疫分析以其靈敏度高、線性動力學范圍寬、光信號持續(xù)時間長、分析方法簡便快速、結果穩(wěn)定、誤差小、安全性好及使用期長等優(yōu)點成為了檢驗界研究的焦點,在臨床診斷、食品安全、環(huán)境監(jiān)測、藥物分析中得到了廣泛運用。在臨床診斷中,化學發(fā)光免疫分析目前主要用于傳染病、腫瘤、甲功、激素的檢測,這些檢測項目占測試總量的75%~80%,占市場金額的60%。
 
化學發(fā)光免疫分析技術分類
化學免疫發(fā)光技術主要有直接化學發(fā)光、酶促化學發(fā)光、電化學發(fā)光。
(1)直接化學發(fā)光
魯米諾類標記的化學發(fā)光免疫分析:魯米諾類物質的發(fā)光為氧化反應發(fā)光。在堿性溶液中,魯米諾可被許多氧化劑氧化發(fā)光,其中H2O2最為常用。
吖啶酯類標記的化學發(fā)光免疫分析:吖啶酯在H2O2和OH-條件下,能迅速發(fā)光,吖啶酯衍生物標記效率高且穩(wěn)定性好,發(fā)光體系簡單、成本低,具有較低本底且能快速檢測。 
(2)酶促化學發(fā)光
酶促化學發(fā)光屬酶免疫分析,只是酶反應的底物是發(fā)光劑。以酶標記生物活性物質進行免疫反應,免疫反應復合物上的酶再作用于發(fā)光底物,在信號試劑作用下發(fā)光,用發(fā)光信號測定儀進行發(fā)光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)。
酶促發(fā)光信號強而穩(wěn)定,發(fā)光時間較長,檢測方式簡單、成本較低,但是工作曲線可能隨時間漂移,而且低端斜率容易呈非線性下移。
(3)電化學發(fā)光免疫分析
電化學發(fā)光免疫分析是指由電化學反應引起的化學發(fā)光過程。ECL的反應在電極表面進行,發(fā)光底物為三聯(lián)吡啶釕,以三丙胺(TPA)來激發(fā)光反應,它包括電化學和化學發(fā)光兩個過程。其標記物非常穩(wěn)定,發(fā)光時間長,靈敏度高,線性范圍寬,反應時間短。
 
素材來源于:網絡

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