緩沖液（Buffer solution）通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中最常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。在工業(yè)上，緩沖溶液常被用于調(diào)節(jié)染料的pH,緩沖溶液還可以被用于pH計(jì)的校正。
緩沖液的作用原理有哪些：
      當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿，或加少量水稀釋時(shí)，溶液有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液（如HOAc與NaOAc），弱堿及其鹽的混合溶液（如NH3·H2O與NH4Cl）等都是緩沖溶液。
作用原理：
     由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí)，H+離子基本上被A-離子消耗：所以溶液的pH值幾乎不變；當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí)，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時(shí)，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L1NaAc組成的緩沖溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過計(jì)算便可證實(shí)。但緩沖溶液組分的濃度不能太大，否則，不能忽視離子間的作用。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí)，緩沖作用減小，緩沖能力降低，當(dāng)c（鹽）/c（酸）為1∶1時(shí)△pH小，緩沖能力大。不論對于酸或堿都有較大的緩沖作用。緩沖溶液的pH值可用下式計(jì)算：此時(shí)緩沖能力大。緩沖組分的比值離1∶1愈遠(yuǎn)，緩沖能力愈小，甚至不能起緩沖作用。對于任何緩沖體系，存在有效緩沖范圍，這個(gè)范圍大致在pKaφ（或pKbφ）兩側(cè)各一個(gè)pH單位之內(nèi)。
常見的TRIS緩沖液
      Tris全稱為三羥甲基氨基甲烷，又叫氨基丁三醇，CAS號(hào)為77-86-1，外觀為白色結(jié)晶粉末。可溶于乙醇和水，也會(huì)與乙酸乙酯溶解但是比較緩慢，不與乙醚、四氯化碳，對銅、鋁有腐蝕作用。
Tris大量應(yīng)用于急性代謝性及呼吸性酸血癥，屬于一種堿性緩沖劑，對代謝酸中毒和酶活動(dòng)反應(yīng)具有良好的緩沖作用，可能引起低血糖、低血壓、惡心、嘔吐。甚至?xí)种坪粑鼘?dǎo)致呼吸停止。過量攝入或者腎功能不全時(shí)可引起堿血癥。當(dāng)Tris和酸量滴定法基準(zhǔn)物質(zhì)使用時(shí)，純度要求會(huì)很高，基本為99.9%-100%
Tris因?yàn)槭侨鯄A性，在溫度為25℃以下時(shí)，Pka為8.1，但是依據(jù)緩沖理論，它的有效緩沖范圍在PH7.0-9.2之間。而Tris的水溶液PH在10.5左右，一般用加鹽酸來調(diào)節(jié)PH值到所需值，不過同時(shí)也要注意溫度對Tris的Pka的影響。由于Tris緩沖液是弱堿性溶液，DNA會(huì)在溶液里被去質(zhì)子化，從而提高其溶解性。所以經(jīng)常有人在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成TE緩沖液，而且把PH值調(diào)節(jié)的溶液換成乙酸，就可以獲得TAE緩沖液。